大鼠心肌细胞H9C2
l细胞背景
B.Kimes and B.Brandt从源于BD1X大鼠胚胎心脏组织的克隆细胞株亚克隆了H9c2(2-1)细胞株,它表现许多骨骼肌的特性。这个细胞株中的成肌细胞能融合形成多核的肌管。如果培养基中的血清浓度下降到1%,融合发生得很快。
l细胞特性
1)来源:心脏
2)形态:成肌细胞,贴壁生长
3)含量:>1x106细胞数
4)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5)用途:仅供科研使用。
l培养条件:
1)准备DMEM(含1.5g/L NaHCO3推荐:awcell-128-0001)或(GIBCO,货号12800017,添加NaHCO3 1.5g/L)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗1%。
2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
l注意事项:
注意:大鼠心肌细胞H9C2该细胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培养基中生长良好,大部分品牌的DMEM含有较高浓度的NaHCO3(3.7g/L),若使用DMEM(3.7g/L NaHCO3)培养基培养细胞时需要提高CO2浓度(7%-10%)。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10�S的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的*培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
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更新时间:2025-02-06 09:27 免费会员
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