PKH26荧光细胞连接试剂盒采用拥有砖利的膜标记技术，砖利膜标记技术，稳定的与细胞膜脂质区结合并发出红色荧光，染色方式依赖于细胞与膜的类型，主要用于细胞体外标记、体外细胞增殖研究及体内外细胞示示踪研究。

一、自备材料：
1.充分分散的单个细胞悬液
2.含血清的组织培养基（培养基）
3.无Ca2+，Mg2+和血清的培养基或者缓冲盐（如Dulbecco’s PBS或Hank’s BSS）
4.血清，白蛋白或其它组织兼容性蛋白
5.离心管（4-15mL）
6.温控离心机（1,000×g）
7.荧光分析设备（荧光读板机，荧光或共聚焦显微镜，流式细胞仪）
8.层流罩
9.血球计数板或细胞计数器
10.载玻片和盖玻片

二、注意事项：
1.亲脂性染料结合到细胞膜上完成标记。染色强度是染料浓度和细胞浓度的函数，与渗透性无关。因此，保证染料添加量不过量非常关键。过标记的细胞将会导致细胞膜完整性缺失或降低细胞活性。
2.本品可用于体内体外细胞的标记，包括干细胞、**细胞、单核细胞、内皮细胞、神经细胞或者任何其他细胞。体内细胞的标记过程需一定的改进，如血小板的染色，或者选择性标记吞噬细胞。
3.本品染色过程中细胞浓度和染料浓度代表操作的起始浓度。该浓度被证明适用于多种细胞。使用者需通过评估染色后细胞活率（如，PI染色）、荧光强度、染色均匀度及是否对所研究细胞功能有影响等，根据实验目的，确定*优的染料浓度和细胞浓度。
4.虽然贴壁细胞也可以染色，但单个悬浮细胞染色均一性更佳。因此用蛋白酶（trypsin/EDTA）将贴壁细胞消化成单个悬浮细胞后再染色效果更佳。
5.PKH26染色过程中，不能存在叠氮化物或代谢毒性物。
6.荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
7.该染料避光保存，使用前观察是否有结晶。如出现结晶，室温防止30min，然后超声或震荡直至溶解。
8.稀释液C可室温或冷藏保存。如果冷藏保存，使用前复温至室温。稀释液C为无菌溶液，不含任何防腐剂和***，其需保持无菌。不要将染料储存于稀释液C中。溶于稀释液C的工作液需现配现用，且配好后需立即使用。

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